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自适应照明STED超高分辨显微镜

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自适应照明STED超高分辨显微镜

自适应照明STED超高分辨显微镜

仪器编号:登录后查看

所属平台: 细胞分析集群

仪器状态:

所属单位: 浙江大学 > 医学院 > 医学院公共技术平台

仪器生产商: Abberior Instruments GmbH

购置日期: 2023-05-30

使用模式: 按时预约

规格型号: Facility Line

放置地址:医学院科研辅楼310

仪器管理员:方三华

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仪器介绍:

STED超高分辨显微镜基本原理是通过物理过程来减少激发光的光斑大小,从而直接减少点扩散函数的半高宽来提高分辨率。它通过使用两种光束(激发光束和STED耗损光束)来实现。其中激发光束用于激发样品中的荧光分子,使其发射出荧光;STED光束会以同心的甜甜圈状光斑作用于同一区域,作用是抑制荧光分子的发射,从而将激发光束的有效范围限制在一个非常小的区域内(见图1)。STED超高分辨显微镜是在激光共聚焦显微镜基础上用纯光学方法实现超分辨功能,无需后期的数学计算,相比单分子定位原理的超高分辨显微镜(STORM 和PALM),具有制样简单、荧光染料要求低、成像速度快以及可用于活细胞检测等优势,目前广泛用于亚细胞器、病毒、神经突触、免疫突触、大分子簇等200 nm以下超微结构的观察。

STED是基于激光共聚焦扫描显微镜的超高分辨显微成像技术,检测器是具有单光子计数的雪崩光电二极管(APD),因此该设备具有激光共聚焦成像、荧光寿命成像以及STED超分辨成像等三个方面功能。在超分辨成像方面,目前广泛用于亚细胞结构观察、分子定位、动态过程追踪、蛋白质相互作用等研究。已成为细胞生物学、神经科学、免疫和微生物学和材料科学学等研究领域中必不可少的研究手段。

该设备特点:

1)高度稳定性和可靠性:STED超高分辨显微镜通过激发光和损耗光的耦合减小有效荧光面积实现超分辨成像功能,这两束光微小的时空位移都会严重影响超分辨效果。该设备采用Easy STED专利技术,大大提升了仪器的稳定性,够确保长时间、高分辨率的稳定成像,维护精力和成本大大降低。

2)光漂白和光毒性大大降低:该设备采用RESCueDyMINMINFIELD STED等自适应照明专利技术,极大降低了样本的光照量,有效降低了光漂白和光毒性,使三维STED成像和活细胞STED成像成为现实。

3)厚样本STED超高分辨成像:该设备配备了自适应光学,能够矫正厚样品深处带来的球差和畸变,加上使用60倍的硅油物镜,大大提升了厚样本的STED超分辨成像效果。

4)成像质量提升:该设备配备了多阵列Matrix 检测器,有效降低图像背景和提升图像反差。


主要参数: 分辨率:3D STED的成像分辨率可以达到80x 80 x 80 nm,2D STED的分辨率可以达到 25 x 25 nm。 光毒性:自适应照明技术RESCue、DyMIN和MINFIELD,比传统STED对样品的漂白和杀伤低约10-100倍。 三维成像:自适应光学技术和面阵列的点探测器技术,使得仪器可用于深三维STED的成像。