主要应用:大质量生物大分子及高异质性复合物的质量表征
基于独特的静电线性离子阱(ELIT)技术,通过同时测定单个离子的质荷比 (m/z) 和电荷数 (z),本仪器突破了传统技术(如 SEC-MALS、质量光度法等)在超大分子异质性解析上的局限,实现对 MDa 量级、高异质性、超大质量分子的直接明确测量与单颗粒级解析。
基本流程
样品前处理和脱盐(生物样品通常使用Bio-Rad尺寸排阻小柱或超滤,将样品置换至200 mM醋酸铵缓冲体系) → 纳升电喷雾(nanoESI)直接进样,电荷检测质谱(CDMS)分析 → 单颗粒数据处理与真实分子量解析
注:如有特殊前处理或特殊体系要求,请务必提前告知管理员商定方案。
服务项目 / 测试范畴
主要测试样品: 重组腺相关病毒(rAAV)、抗体、DNA质粒、蛋白复合物、外泌体。
其他样品范畴: 高分子聚合物,以及酶、噬菌体、mRNA、病毒样颗粒/类病毒颗粒等。
核心表征方向:
病毒与载体分析: 区分 rAAV 的空衣壳、部分完整衣壳和完整衣壳颗粒并提供相对定量。
核酸药物评估: 评估核酸药物与质粒 DNA 的完整性与异质性。
蛋白质复合物测定: 直接测定大分子蛋白质复合物的天然状态完整质量数,无需繁琐的去卷积分配。
极复杂混合物与超大质量分子解析: 针对质量范围高达MDa级的大分子组装体进行分子量表征;对高度复杂的混合物提供清晰、准确的单颗粒级质量解析,无需依赖碎片离子或间接推断。
送样要求
样品要求
仪器理论质量下限为 10 kDa【电荷数 (z) 需不低于 5,且质荷比 (m/z) 不低于 2000】,建议不低于20 kDa。
上机样品需要去除干扰质谱检测的组分,例如高浓度的非挥发性盐、表面活性剂、不溶颗粒物等。
单次进样量不小于 10 μL,为了保证测试顺利及方法优化,建议送样量留有一定冗余。
溶液样品上机摩尔浓度建议不低于 25 nM(或参考mAb 0.005 mg/mL,rAAV 10^12 vg/mL,外泌体10^10 particles/mL),建议提供高浓度样品以备上机前稀释。
预约沟通: 由于大分子及高异质性样品差异较大,测试方法需针对性优化,送样前请务必提前联系仪器管理员。
联系方式: 仪器管理员:周默为(moweizhou@zju.edu.cn ,浙大钉/钉钉号zmwzju),郭鑫淼(Email: 22537029@zju.edu.cn)。
成果致谢
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We acknowledge the support by the Instrument Innovation Program of Institute of Fundamental and Transdisciplinary Research, and the Consortium for Advanced Technologies of Mass Spectrometry at Zhejiang University.
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致谢浙江大学基础交叉仪器创新支撑中心项目资助和浙江大学质谱先进技术集群的支持。