基本流程
目标蛋白提取和纯化→蛋白质的酶解和纯化→色谱质谱分析→基本数据处理(搜库鉴定&相对定量)→高阶数据处理(生信分析)
平台目前提供色谱质谱分析和基本数据处理(直接进样),蛋白质的酶解和纯化需要额外收费,具体请联系管理员。
服务项目
数据依赖采集(data dependent acquisition)的非标记定量蛋白质组(label free quantitation)。
FAIMS离子淌度增加鉴定深度。
送样要求
上机样品需要去除干扰质谱检测的组分,例如高浓度的盐、表面活性剂、不溶颗粒物等。
建议送样量不低于μg级别。
送溶液样品的,建议浓度不低于0.1μg/μL,使用色谱纯及以上的溶剂,高质量的进样管降低污染风险。样品量低的,建议使用低吸附的样品管和移液枪头处理样品。
强烈建议搜索相关参考文献,使用验证过的方法制备样品。
如需要平台协助前处理的,请提前联系管理员。
请下载送样单,填写打印后与样品一同送至平台。送样请参见送样流程。
手机端预约请先参考教程,电脑端登录账号后,在微信公众号【浙江大学实验室与设备管理处】绑定微信后操作。
特殊应用:完整大分子、高分子、超分子结构解析
平台目前提供针对完整大分子和非共价相互作用的复合体、超分子的质谱解析。检测方法主要基于自上而下(Top-Down)质谱和非变性质谱(Native mass spectrometry)。
由于样品性质差异较大,此类应用通常需要针对样品进行一定的方法优化。送样前建议联系周默为(moweizhou@zju.edu.cn ,浙大钉/钉钉号zmwzju)商量方案。
服务项目
生物大分子和高分子的完整分子量解析(高分辨最适范围在3万Da以下,更大分子的分辨率受限)
非共价复合物和超分子的非变性质谱分析
常规电喷雾中可能分解的亚稳态分子的检测
结合离子淌度和二级质谱进行结构解析
送样要求
上机样品需要去除干扰质谱检测的组分,例如高浓度的盐、表面活性剂、不溶颗粒物等。
建议送样量不低于μg级别。因为需要针对样品性质优化方法,请尽量提供额外的样品便于测试。
对于检测非共价相互作用的,建议提前测试样品保持相互作用的最佳溶剂条件。例如结合强度、是否需要特定离子强度、金属/小分子配体等辅助因子,以提高检测的成功率。
成果致谢
在科研成果中合理地对平台表示感谢对于业绩统计和管理至关重要,因为只有平台的持续稳定发展,才能为科研工作者们提供更优质的服务。
使用平台仪器发表成果的,建议使用以下格式的致谢文字(可根据情况调整,请勿更改粗体字样):
English:
We acknowledge 【name】 at the Chemistry Instrumentation Center, the Consortium for Advanced Technologies of Mass Spectrometry at Zhejiang University for the mass spectrometry analysis.
中文:
致谢浙江大学质谱先进技术集群,化学分析测试平台的【人名】提供质谱分析帮助。