仪器特色:a:形态学观察。利用病毒转染或转基因特异性表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)技术来标记某类神经细胞是进行形态学观察的重要手段之一。双光子显微镜可以观察较大深度内细胞和亚细胞结构的数量、大小、空间分布、生长消失、运动以及共定位等重要性质。 b:细胞成像。。双光子显微镜的单细胞分辨率使得我们可以在活体的条件下进行细胞计数,利用活体双光子显微镜也可以检测细胞的运动状态。 c:亚细胞结构。双光子显微镜因为其良好空间分辨率和较好的信噪比,使得我们在活体条件下不仅能够清楚地观察到细胞的胞体,还能够较为清晰的观察到亚细胞结构。 d:钙信号成像。通过活体双光子成像,不仅可以在单细胞或突触水平来研究神经细胞的钙活动;在大范围的细胞分辨率成像也能够同时记录数百个细胞,研究神经网络的信号传递和编码。 e:神经-胶质-血管通讯成像。由于血脑屏障的存在,血管内的染料和脑组织中的钙染料不会相互渗透,因此,利用双光子显微成像可以同时观测血液动力学性质和细胞钙信号的变化,这为研究神经元-胶质细胞-血管之间的通讯提供了极大的便利。
服务内容:在活体动物中,在更高的空间分辨率和时间分辨率水平对神经活动进行观察,已经成为神经生物学研究的方向。 目前为止,大量国外研究机构已经将活体双光子成像技术应用于脑科学研究的各个方面。Takata等利用双光子显微镜研究了星形胶质细胞在体感区皮层的分布情况。利用星形胶质细胞特异性的活细胞荧光染料SR101进行标记,他们发现皮层第I层的星形胶质细胞数量要显著高于第II、III层。Nimmerjahn等发现在脑实质中小胶质细胞在静息状态下也是高度活跃的,利用运动伪足和突起等持续不断的与微环境进行交流。Wake等则首次发现皮层小胶质细胞的伪足与神经元突触之间存在着每小时一次的短暂而直接的联系。Inada等在新生鼠脑内研究了皮层γ-氨基丁酸(GABA)能中间神经元细胞迁移的移动速率、迁移方向和细胞比例等基本性质。